logo

 

クリューバー・バレラ染色
(ルクソール・ファースト青染色)
Kluver-Barrera's stain

* 原理 *

LFB(Luxol Fast Blue)とミエリンの特異的な親和性を利用し、髄鞘を染色し、その後クレシル紫で神経細胞にニッスル染色を施したものである。

* 試薬 *

 o 0.1%ルクソールファースト青液
   ルクソールファースト青 0.1
   95%エタノール 100ml
   10%酢酸水 0.5ml
 o 95%エタノール
 o 0.05%炭酸リチウム水溶液
 o 70%エタノール
 o 0.1%クレシル紫液
   クレシル紫 0.1g
   蒸留水 100ml
 使用時に10%酢酸水を15滴滴下し濾過す
 る。

* 染色結果*

 髄鞘  …  青色
 ニッスル小体、核  …  紫色
 神経細胞の核小体  …  深青色

* 方法 *

1. 脱パラ、95%アルコール
2. 0.1%ルクソールファースト青液
 (58〜60℃、1晩)
3. 95%エタノール
4. 蒸留水
5. 0.05%炭酸リチウム水溶液で分別
6. 70%エタノール I・II で分別
  白質 … 青
  灰白質 … 白
7. 蒸留水 I・II
8. 0.1%クレシル紫液(5〜8分)
9. 95%エタノールで分別
10. 100%エタノール
11. 透徹、封入

※0.1%ルクソールファースト青液染色後
 は室温で1〜2時間放冷する。
※0.1%クレシル紫液はあらかじめ37℃に
 温めておく。
※胎児、新生児期、幼児期と発育する過
 程において、髄鞘の形成が脳の部分に
 よって早い部分と遅くて不充分な部分
 が あり、そこを髄鞘染色しても染まら
 ないのが普通である。

YAMAGUCHI KAZUMI